摘要:为了解双黄连口服液对自然发病鸡散发性新城疫病的治疗效果,从而为其临床应用提供科学依据。将550只发病鸡随机分为5组,即双黄连口服液高、中、低剂量组、鸡高免卵黄抗体对照组、阳性对照组;另设110只健康鸡作空白对照组。经用药治疗,结果表明双黄连口服液对治疗鸡散发性新城疫病具有明显的效果,可降低死亡率,提高成活率,减少自然发病引起的病理损伤;其中1ml/只、0.5ml/只、0.25ml/只,高剂量组双黄连口服液疗效尤为显著。
一、材料与方法
1、供试药品:
<1> 实验药物:由金银花提取物、连翘提取物、黄芩提取物按一定比例制成双黄连口服液,批号(20051213),规格250mL/瓶,由天津万象药业有限公司生产,用量:禽0.25~0.5ml。
<2>对照药品:鸡高免卵黄抗体,河北农业大学动物科技学院微生物实验室提供,用量:1ml/只,肌肉注射,一次。
2、试验动物:选取保定三和养殖场发病的60日龄鸡550羽,和同期饲养的健康鸡110羽。
3、培养基、诊断试剂:
麦康凯琼脂(不含结晶紫)、营养琼脂、营养肉汤、均按使用说明配制。麦康凯琼脂、营养琼脂、三糖铁琼脂(TSI)购于杭州天和微生物试剂有限公司,营养肉汤购于北京双旋微生物培养基制品厂。
标准阳性血清:由河北农大传染病实验室提供
4、 实验方法 :
<1>发病鸡群临床诊断
①临床症状:其临床表现为食欲减退,精神萎靡,不愿走动,眼半开或全闭,张口呼吸,并发出咯咯声,嗉囊内充满内容物,粪便稀薄,呈黄绿色或黄白色,小部分鸡出现神经症状,患鸡翅腿麻痹,跛行或站立不稳,动作失调。
②病理变化:其主要病变全身浆膜粘膜出血,淋巴系统肿胀、出血和坏死。肠道的淋巴滤泡肿胀、出血,严重者出现溃疡,尤其以盲肠扁桃体、十二指肠升段的后1/3处、空肠卵黄憩室后的2-3处,回肠的前1/3处病变明显。腺胃乳头出血或出现溃疡和坏死。肌胃粘膜皱襞的底部出血。泄殖腔有条状或斑状出血。

<2>实验室诊断?
①细菌检验:采取病鸡的肝和心血涂片、革兰氏染色后镜检,并分别接种于普通营养琼脂平板上,37℃培养48h,观察无菌落生长。
②血清学诊断:取病鸡的血液分离血清后进行新城疫HI试验,检测抗体效价高、低差5个滴度。
③病毒分离和鉴定:无菌采集病鸡的气管、肝、肺,剪碎后按1:10加入生理盐水以青链霉素各2000国际单位/毫升,捣碎后3000转/分离心,取上清液接种未进行免疫的10日龄鸡胚尿囊腔内24h后弃去死亡胚,37℃培养72h后,收集尿囊液作HA和HI试验阳性。
结论:据临床症状、病理变化结合实验室诊断,可确诊本病理为新城疫感染。
④ 实验分组:将550只试验鸡随机分为5组,每组110只; 同期饲养的健康鸡110羽为第6组。第1组~第6组依次为双黄连口服液高、中、低剂量治疗组、鸡高免卵黄抗体对照组、阳性对照组、空白对照组。各组给药及处理情况见表1。
表1? 试验鸡分组及给药情况
组别 |
数量(只) |
初始重(g) |
处理 |
1 |
110 |
420.4±13.3 |
发病,1ml/只, 口服试验药物,4d |
2 |
110 |
421.1±15.2 |
发病,0.5ml/只,口服试验药物4d |
3 |
110 |
420.6±14.2 |
发病,0.25ml/只,口服试验药物4d |
4 |
110 |
421.3±12.7 |
发病,1ml/只,肌注对照药物一次 |
5 |
110 |
421.4±15.2 |
发病,不给药 |
6 |
110 |
420.6±12.5 |
不发病,不给药 |
5、饲养管理:笼养,鸡舍温度随日龄变化调整到25~31℃,湿度60%-65%。试验过程中由专人饲养管理,饲喂、饮水和饲养管理按常规方法进行。
6、记录与观察:混饮给药,每天集中给药1次,连用4天,鸡高免卵黄抗体对照组,1ml/只肌肉注射,只注射一次。停药后对动物的临床情况进行跟踪观察,整个观察期持续到停药后15天,试验前及观察结束后对试验鸡称重,计算每组平均体重。
7、结果评价指标
治愈率:试验期间,给药鸡临床症状消失,精神、食欲、呼吸、粪便等恢复正常,增重接近或超过空白对照组的,均属治愈。根据各组动物治愈数计算治愈率。
显效率:试验期间,用药后发病鸡的食欲、精神、粪便等症状与阳性对照组相比明显减轻的鸡均判定为显效。根据每组动物中的显效数计算其显效率。
有效率:治愈和显效均判定为有效,根据每组动物的有效数计算其有效率。
无效率:试验期间,用药后临床症状未见减轻或消失以及有死亡的鸡均判定为无效。根据每组动物中的无效数计算其无效率。
死亡率:试验期间,因鸡新城疫病毒感染引起的鸡只死亡数,根据每组动物中的死亡数计算其死亡率。
相对增重率:各组的平均增重与不发病不给药组的平均增重之比,其中不发病不给药组设定为100%。
数据分析处理:用生物统计方法进行数据的显著性检验,各组动物试验期的治愈率、死亡率及体重均采用SPSS12.0检验。
二、试验结果
空白对照组鸡在试验期间精神良好、饮食欲、粪便等正常。
各给药的精神沉郁、萎顿、腹泻、扎堆、食欲减退等症状经用药治疗,临床症状有不同程度的改善。双黄连口服液高剂量组和中剂量组用药后48h内各有1只死亡。双黄连口服液低剂量组与鸡高免卵黄抗体对照组的在用药后3天内分别有4只死亡。
给药后每天观察临床情况并记录,15天的治疗情况见表2?
表2 各组治疗试验结果(X±S.E.)
组别 |
数量
(只) |
死亡数
(只) |
治愈率
(%) |
显效率
(%) |
有效率
(%) |
无效率
(%) |
死亡率
(%) |
试验期
增重(g) |
相对增
重率(%) |
1 |
110 |
1 |
83.7 |
5.7 |
94.3 |
5.7 |
5.7a |
459.4±5.6 |
91.9 a |
2 |
110 |
1 |
80.4 |
3.3 |
96.7 |
5.7 |
5.7a |
453.8±8.2 |
89.6 a |
3 |
110 |
4 |
51.4 |
13.3 |
80.0 |
20.0 |
13.3a |
45.6±6.9 |
85.7a |
4 |
110 |
4 |
80.7 |
10.0 |
83.3 |
16.7 |
13.3a |
451.1±8.4 |
88.4a |
5 |
110 |
24 |
20* |
- |
- |
- |
80.0b |
450.7±9.1 |
58.9a |
6 |
110 |
0 |
- |
- |
- |
- |
0a |
458.7±6.6 |
100a |
注:发病不用药组的治愈率为自愈率。
注:a:p<0.01与发病对照组比较差异极显著;b:p<0.01 与对照药物组比较差异显著。
三、结论
(1)通过自然发病病例,使用双黄连口服液给药治疗试验药物组的死亡率均极显著低于阳性对照组(P<0.01),治愈率高、中剂量组显著高于低剂量组(P<0.05),和西药对照组差异不显著(P>0.05), 高、中剂量组间差异不显著(P>0.05),双黄连口服液与鸡高免卵黄抗体治疗鸡散发性新城疫病效果相当。
(2)双黄连口服液是目前公认的疗效确切的抗病毒类纯中药制剂,并且被人药典和兽药典收载。双黄连口服液中三药相合,共奏辛凉解表,清热解毒之功。瘟病初起,邪在卫分,故治宜辛凉解表。?
参考文献:
[1] 农业部.兽药试验技术规范,2001.
[2] 农业部.农业部公告426号.
[3] 张克家.中兽医对病毒病的防治[J].中国兽药杂志,2001(2):38-39.
[4] 刘文森、王学林、王承宇等抗新城疫复方中药制剂要力作用于临床试验[J].吉林农业大学学报.2004,26(6):680-693.
[5] 舒刚、王频捷.中药制剂“克瘟灵”治疗鸡新城疫[J].兽药与饲料添加剂.2003(8):20-21.
双 黄 连 口 服 液
—辛凉解表、清热解毒、抗菌消炎、提高免疫力
一、主要成分:金银花、连翘提取物? 黄芩提取物? 抗病毒因子
二、功能与主治:辛凉解表、清热解毒、抗菌消炎。主治禽流行性感冒、类减蛋综合症、传染性法氏囊炎、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、病毒性肝炎、细小病毒病等各种病毒性疾病或上呼吸道感染。对伤寒、肺炎、大肠杆菌有较强抑制作用。
三、产品特点:
1、本品可提高机体免疫系统功能,诱导机体产生干扰素,并能抑制病毒在细胞内的复制、增殖,具有抗病毒、抗菌、消炎、提高免疫力等多重功能。
2、同时针对家禽呼吸道感染,感冒发烧效果更明显。
3、本品为纯中药制剂,无残留,不影响家禽出口。
四、用法与用量:本品每瓶250ml兑水300kg,供鸡、鸭、鹅、鹧鸪、鹌鹑等禽类自由饮用,也可将全天药量集中一次饮用效果更佳,连用3-5天,严重感染酌情加量或遵医嘱。
五、配伍禁忌:本品无配伍禁忌。
六、临床推广:本品对以下疾病如禽流行性感冒、类减蛋综合症、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、病毒性肝炎、细小病毒病疗效确切,值得大面积推广。
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